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单细胞亚群细胞数量不一致,如何实现抽样? #5816

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单细胞亚群细胞数量不一致,如何实现抽样? by Investigator进修录


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有人提问,他自己做单细胞的gsva, 细胞通讯,转录因子,拟时序, inferCNV这些分析,发现特别的消耗计算资源,因为项目很多,每个细胞亚群都是过万的细胞。希望可以将这些单细胞亚群进行抽样,使得其细胞数量一致。

我们以 seurat 官方教程为例:

rm(list = ls())
library(Seurat)
# devtools::install_github('satijalab/seurat-data')
library(SeuratData)
library(ggplot2)
library(patchwork)
library(dplyr)
load(file = 'basic.sce.pbmc.Rdata')

DimPlot(pbmc, reduction = 'umap'
        label = TRUE, pt.size = 0.5) + NoLegend()

sce=pbmc

如果你不知道 basic.sce.pbmc.Rdata 这个文件如何得到的,麻烦自己去跑一下 可视化单细胞亚群的标记基因的5个方法,自己 save(pbmc,file = 'basic.sce.pbmc.Rdata') ,我们后面的教程都是依赖于这个 文件哦!

比如subset函数就有downsample参数

使用起来超级方便,subset(sce, downsample = 15) 即可,全部的 代码如下:

features= c('IL7R''CCR7','CD14''LYZ',  'IL7R''S100A4',"MS4A1""CD8A",'FOXP3',
            'FCGR3A''MS4A7''GNLY''NKG7',
            'FCER1A''CST3','PPBP')

DoHeatmap(subset(sce ), 
          features = features, 
          size = 3
          )
table(Idents(sce))
DoHeatmap(subset(sce, downsample = 15), 
          features = features, size = 3)

抽样前后很容易看出来:

可以看到:

自己写函数进行抽样


# 每个细胞亚群抽10 
allCells=names(Idents(sce))
allType = levels(Idents(sce))

choose_Cells = unlist(lapply(allType, function(x){
  cgCells = allCells[Idents(sce)== x ]
  cg=sample(cgCells,10)
  cg
}))

cg_sce = sce[, allCells %in% choose_Cells]
cg_sce
table(Idents(cg_sce))

可以看到抽样很成功:

> as.data.frame(table(Idents(cg_sce)))
          Var1 Freq
1  Naive CD4 T   10
2   CD14+ Mono   10
3 Memory CD4 T   10
4            B   10
5        CD8 T   10
6 FCGR3A+ Mono   10
7           NK   10
8           DC   10
9     Platelet   10

注:如果想要获取文中代码。后台回复单细胞亚群即可!

往期回顾

提取单细胞亚群进行后续再分析

不知道你的单细胞分多少群合适,clustree帮助你

多个单细胞亚群合并

公开课-单细胞数据基础分析






如果你对单细胞转录组研究感兴趣,但又不知道如何入门,也许你可以关注一下下面的课程



看完记得顺手点个“在看”哦!


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